Ang ganap na awtomatikong nucleic acid extraction at detection machine ng New Tech

Limang lakas:
● Instrumentong na-configure gamit ang nucleic acid extraction at purified step
● Instrumentong na-configure gamit ang ultrasonic extraction module
● Instrumentong na-configure nang ganap na awtomatiko
● Instrumentong na-configure na may variable na amplification ng temperatura
● Instrumentong na-configure na may ganap na nakapaloob na reagent kit

1. Kailangan bang kunin at linisin ang mga nucleic acid detection reagents?
Ang prinsipyo ng pagtuklas ng nucleic acid ay ang mga sumusunod:sa ilalim ng pagkilos ng primer, ang DNA polymerase ay ginagamit upang magsagawa ng chain reaction amplification sa template ng DNA/RNA (nangangailangan ng reverse transcription ng NA), at pagkatapos ay ang halaga ng fluorescent signal na inilabas ay nakita upang matukoy kung ang sample ay naglalaman ng nucleic acid (DNA/RNA) ng pathogen na matutukoy.

1) Ang mga sample na hindi pa na-extract o na-purify ay maaaring maglaman ng maraming bahagi na makakaapekto sa huling resulta: nuclease (na maaaring matunaw ang target na nucleic acid at maging sanhi ng false negative ), protease (na maaaring mabawasan ang DNA polymerase at maging sanhi ng false negative), heavy metal asin (na humahantong sa inactivation ng synthase at nagiging sanhi ng false positive ), masyadong acidic o masyadong alkaline PH (na maaaring maging sanhi ng pagbagsak ng reaksyon), Incomplete RNA (humahantong sa false negative reverse transcription failure).

2) Ang ilang mga sample ay mahirap palakihin nang direkta: Gram-positive at ilang mga parasito, dahil sa kanilang makapal na mga cell wall at iba pang mga istruktura, kung hindi sila dumaan sa proseso ng pagkuha at paglilinis ng nucleic acid, maaaring mabigo ang extraction-free kit para sa naturang mga sample.

Samakatuwid, inirerekumenda na piliin ang test kit o instrumento na na-configure sa hakbang ng pagkuha ng nucleic acid.

2. Chemical extraction o physical ultrasonic fragmentation extraction?
Sa pangkalahatan, ang chemical extraction ay maaaring ilapat sa karamihan ng pretreatment at Purification.Gayunpaman, sa makapal na pader na Gram-positive bacteria at ilang mga parasito, ito rin ang kaso na ang chemical extraction ay hindi makakakuha ng epektibong nucleic acid templates, na nagreresulta sa false negative detection.Bilang karagdagan, ang pagkuha ng kemikal ay madalas na gumagamit ng mga malakas na ahente, kung ang elution ay hindi masinsinan, madaling ipasok ang malakas na alkali sa sistema ng reaksyon, na nagreresulta sa hindi tumpak na mga resulta.

Ang ultrasonic fragmentation ay gumagamit ng pisikal na pagdurog, na matagumpay na ginamit ng GeneXpert, isang nangungunang negosyo sa larangan ng POCT para sa paggamit ng tao, at may ganap na kalamangan sa pagkuha ng nucleic acid ng ilang kumplikadong sample (tulad ng Mycobacterium tuberculosis).

Samakatuwid, inirerekumenda na pumili ng isang test kit o instrumento na naka-configure sa isang hakbang sa pagkuha ng nucleic acid.at ito ay pinakamainam kung mayroong isang ultrasonic extraction module.

3. Manwal , Semi-awtomatiko at ganap na awtomatiko?
Ito ay isang problema ng gastos sa paggawa at kahusayan sa trabaho.Sa kasalukuyan, ang mga pet hospital na walang sapat na kawani, at ang pagkuha at pagtuklas ng nucleic acid ay isang gawain na nangangailangan ng ilang mga kasanayan at karanasan.Walang alinlangan na ang ganap na awtomatikong nucleic acid extraction at detection machine ay ang perpektong pagpipilian.

4. Patuloy na pagpapalakas ng temperatura o pagpapalakas ng variable na temperatura?
Ang reaksyon ng pagpapalakas ay isang link sa pagtuklas ng nucleic acid, at ang propesyonal na teknolohiyang kasangkot sa link na ito ay kumplikado.Sa halos pagsasalita, ang mga enzyme ay ginagamit upang palakasin ang nucleic acid.Sa proseso ng pagpapalakas, ang signal ng pinalakas na fluorescence o ang naka-embed na signal ng fluorescence ay nakita.Sa pangkalahatan, mas maagang lumabas ang fluorescence signal, mas malaki ang target na gene content ng sample.

Ang patuloy na pagpapalakas ng temperatura ay isang pagpapalakas ng nucleic acid sa isang nakapirming temperatura, habang ang pagpapalakas ng variable na temperatura ay isang paikot na pagpapalakas na mahigpit ayon sa denaturation-annealing-extension.Ang patuloy na oras ng pagpapalakas ng temperatura ay isinagawa, habang ang oras ng pagpapalakas ng variable na temperatura ay lubos na naaapektuhan ng bilis ng pagtaas at pagbaba ng temperatura ng instrumento (sa kasalukuyan, maraming mga tagagawa ang nakagawa ng 40 na mga siklo ng pagpapalakas sa loob ng humigit-kumulang 30 minuto).

Kung ang mga kondisyon ng laboratoryo ay mabuti at ang zoning ay mahigpit, makatwirang sabihin na ang katumpakan na pagkakaiba sa pagitan ng dalawa ay hindi magiging malaki.Gayunpaman, ang variable na pagpapalakas ng temperatura ay mag-synthesize ng mas maraming produkto ng nucleic acid sa mas maikling panahon.Para sa mga laboratoryo na walang mahigpit na zoning at propesyonal na mga tauhan ng pagsasanay, ang panganib ng nucleic acid aerosol leakage ay mas malaki, ang false positive ay nangyayari kapag nangyari ang leakage, at na lubhang mahirap alisin.

Bilang karagdagan, ang patuloy na pagpapalakas ng temperatura ay mas madaling kapitan ng hindi tiyak na pagpapalakas kapag ang sample ay kumplikado (ang relatibong temperatura ng reaksyon ay mas mababa, at mas mataas ang temperatura ng extension, mas mahusay ang panimulang pagbubuklod na pagtitiyak).

Sa abot ng kasalukuyang teknolohiya, mas maaasahan ang variable temperature amplification.

5. Paano maiiwasan ang panganib ng pagtagas ng mga produkto ng pagpapalakas ng nucleic acid?
Sa kasalukuyan, pinipili ng maraming mga tagagawa ang gland type PCR tube bilang ang nucleic acid reaction tube, na selyadong sa pamamagitan ng friction, at ang temperatura denaturation sa variable temperature denaturation sa variable temperature PCR amplification ay umabot sa 90 degree.
Centigrade .Ang paulit-ulit na proseso ng pagpapalawak na may init at pag-urong na may malamig ay isang malaking hamon sa sealing ng PCR tube, at ang gland type PCR tube ay medyo madaling maging sanhi ng pagtagas.

Mas mainam na gamitin ang reaksyon na may ganap na selyadong kit/tube upang maiwasan ang pagtagas ng produkto ng reaksyon .Ito ay magiging perpekto kung magkakaroon ng isang ganap na selyadong kit para sa pagkuha at pagtuklas ng nucleic acid.

Kaya ang bagong ganap na awtomatikong nucleic acid extraction at detection machine ng New Tech ay mayroong limang pinakamainam na pagpipilian sa itaas.